MTT法檢測細(xì)胞活性的原理是什么
導(dǎo)讀MTT法是常用的一種細(xì)胞活性檢測方法,其原理是通過將MTT熒光染料作用于細(xì)胞內(nèi),利用細(xì)胞內(nèi)活性代謝產(chǎn)物還原MTT熒光染料為紫色雜質(zhì),通過檢測雜質(zhì)吸光光譜來判斷細(xì)胞的存活率和代謝活力。檢測時,步驟一般包括細(xì)胞處理、加入MTT染料等。 ...
MTT法是常用的一種細(xì)胞活性檢測方法,其原理是通過將MTT熒光染料作用于細(xì)胞內(nèi),利用細(xì)胞內(nèi)活性代謝產(chǎn)物還原MTT熒光染料為紫色雜質(zhì),通過檢測雜質(zhì)吸光光譜來判斷細(xì)胞的存活率和代謝活力。檢測時,步驟一般包括細(xì)胞處理、加入MTT染料、細(xì)胞還原MTT熒光染料、溶解細(xì)胞、吸光度檢測等。
1、細(xì)胞處理:將需要檢測的細(xì)胞培養(yǎng)在含有試驗物質(zhì)的培養(yǎng)基中,或者將不同條件下的細(xì)胞分別處理。
2、加入MTT染料:在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入一定濃度的MTT熒光染料,MTT熒光染料會穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。
3、細(xì)胞還原MTT熒光染料:MTT熒光染料在細(xì)胞內(nèi)被代謝酶還原為紫色的雜質(zhì)。
4、溶解細(xì)胞:加入溶劑將細(xì)胞溶解,同時將還原后的紫色雜質(zhì)溶解在細(xì)胞培養(yǎng)基中。
5、吸光度檢測:使用酶標(biāo)儀檢測細(xì)胞溶液的吸光度,MTT染料還原產(chǎn)生的紫色雜質(zhì)的吸光值與細(xì)胞的存活率和代謝活力成正比。通過檢測MTT還原后紫色產(chǎn)物在570-630 nm范圍內(nèi)的吸光值,計算細(xì)胞活性和細(xì)胞存活率。
MTT法通過檢測紫色雜質(zhì)吸光光譜來推斷細(xì)胞存活率和代謝活力,是一種便捷、直觀、快速的細(xì)胞學(xué)檢測方法,建議患者選擇正規(guī)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行這項檢測。